Background. In current clinical practice, there are no clear criteria for selecting management strategies for patients with initial, potentially reversible, signs of cervical dysplasia. Considering the known role of small regulatory RNAs (microRNAs) in cervical carcinogenesis, these molecules may serve as prognostic markers.
Aim. To develop and evaluate the prognostic potential of a microRNAs analysis technology based on micro-array polymerase chain reaction.
Materials and methods. Cervical swab material obtained from women of reproductive age, following a cytological diagnosis of LSIL (low-grade squamous intraepithelial lesion), was used in the study. RNA was isolated using spin columns. A semi-quantitative analysis of 24 microRNA molecules was performed using sequential polyadenylation, reverse transcription, and micro-array polymerase chain reaction reactions. To evaluate the results, expression ratios of “reciprocal pairs” of microRNAs were calculated, the statistical significance of observed differences was assessed using the Mann–Whitney test, and ROC analysis was applied to evaluate prognostic significance indicators.
Results. The developed method, based on the analysis of six microRNA molecules, allows for the prediction of the development of severe cervical epithelial dysplasia (HSIL) within 4–6 months with a sensitivity of 0.83 and a specificity of 0.83.
Conclusion. The analysis of microRNAs in cervical swab material, conducted using micro-array polymerase chain reaction and the proposed interpretation algorithm, can become a convenient tool for predicting the course of mild cervical epithelial dysplasia.
Введение. В современной клинической практике нет четких критериев выбора тактики ведения пациенток с начальными, потенциально обратимыми, признаками цервикальной дисплазии. С учетом известной роли, которую играют малые регуляторные РНК (микроРНК) в цервикальном канцерогенезе, эти молекулы могут служить прогностическими маркерами.
Цель исследования – разработка и оценка прогностического потенциала технологии анализа микроРНК на основе микрочиповой полимеразной цепной реакции.
Материалы и методы. В исследовании был использован материал цервикального мазка, взятый от женщин репродуктивного возраста, после получения цитологического заключения LSIL (low-grade squamous intraepithelial lesion, плоскоклеточное интраэпителиальное поражение низкой степени). РНК была выделена с использованием спин-колонок. Полуколичественный анализ 24 молекул микроРНК был проведен с помощью последовательных реакций полиаденилирования, обратной транскрипции и полимеразной цепной реакции в формате микрочипов. Для оценки результатов выполнен расчет соотношений экспрессии «реципрокных пар» микроРНК, статистическая значимость наблюдаемых различий оценена с помощью теста Манна–Уитни, для оценки показателей прогностической значимости применяли ROC-анализ.
Результаты. Разработанный метод на основе анализа 6 молекул микроРНК позволяет прогнозировать развитие тяжелой дисплазии цервикального эпителия (HSIL) в течение 4–6 мес с чувствительностью 0,83 и специфичностью 0,83.
Выводы. Анализ микроРНК в материале цервикального мазка, проведенный с помощью микрочиповой полимеразной цепной реакции и предложенного алгоритма интерпретации результатов, может стать удобным инструментом прогнозирования течения легкой дисплазии цервикального эпителия.